聚丙烯酰胺凝胶是什么(教你配制方法及电泳的原理)

聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作:首先在制胶前准备玻璃板、垂直平板支架的安装、密封好玻璃板。

聚丙烯酰胺凝胶电泳操作方法

1、先用洗涤剂将玻璃板反复清洗,再用清水冲洗干净,待玻璃板晾干后,将1mm塑料薄片沾少许清水,使其贴在玻璃板上,然后将另一块凹行玻璃板与原玻璃板紧贴。

2、再将贴好的玻璃板,放入垂直支架内,两侧用钢夹使其固定,钢夹的高度不要超过凹行玻璃的凹口处为宜,两侧选用力度对称、大小适中的钢夹。

3、用微波炉将1%琼脂糖加热融化后,倒入支架板底槽中,将其密封即可,然后用吸管吸取少量琼脂溶液,加入到玻璃板两边的缝隙内,将其密封,冷却凝固后备用。

用30%的丙烯酰胺溶液10ml;10xTBE溶液4ml;双蒸水16ml;20%的过硫酸铵(AP)200ul;TEMED溶液20ul配制PAGE凝胶。

把垂直支架倾斜30°,将配好的PAGE凝胶溶液沿凹形玻璃平口处缓缓倒入至距平口7mm处为宜,灌胶完成后,用枪吸取少量水密封胶口,压平胶面即可,后续可以开始点样电泳。

用微量移液器吸取1ul的溴酚蓝溶液,根据PCR产物量大小吸取适量样品,点入胶孔内即可。点样结束后,接通电源,调节电压至300V,90min,电泳时间根据PCR产物分子量适当延长。

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